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    原代細胞培養體系是研究細胞生物學(xué)和生物醫學(xué)的重要工具

    發(fā)布時(shí)間: 2023-03-10  點(diǎn)擊次數: 1188次
      原代細胞培養體系是在無(wú)血清的條件下,使用營(yíng)養液和適合細胞生長(cháng)的基質(zhì)來(lái)培養從動(dòng)物體內取得、未經(jīng)過(guò)培養和分離的原代細胞。這種培養方法可以維持細胞的各種原始性狀,包括形態(tài)、基因表達模式、生長(cháng)倍增時(shí)間、信號轉導途徑等等。

      在原代細胞培養體系中,細胞通常是在培養皿或培養瓶中生長(cháng)的。為了維持細胞的正常生長(cháng),需要提供充足的營(yíng)養物質(zhì)、適宜的氧氣濃度和pH值,并且要保持細胞培養容器的清潔和無(wú)菌狀態(tài)。在培養細胞的過(guò)程中,有時(shí)也需要添加一些生長(cháng)因子、膠原蛋白和膠原酶等物質(zhì),以促進(jìn)細胞生長(cháng)和分化。

      為了儲存原代細胞,可以采用低溫保存或凍存的方法。低溫保存一般使用液氮或干冰等高質(zhì)量的低溫冰霜來(lái)存儲細胞。在凍存細胞時(shí),一般會(huì )將細胞懸浮在含有10% DMSO(二甲基亞砜)的培養基中,然后將其置于液氮中。這種方法可以保證細胞的正常存活,并可以長(cháng)期保存細胞。
     

     

      原代細胞培養體系指的是從組織或器官中取得的初代細胞,通過(guò)分離和培養形成的體系。它是研究細胞生物學(xué)和生物醫學(xué)的重要工具。

      原代細胞的分離和培養一般包括如下步驟:

      1. 制備工具和試劑。需要準備顯微鏡、離心機、生物安全柜、培養皿、培養基、酶、抗生素等。

      2. 取得組織樣本??梢允莿?dòng)物或植物的各種組織,如肝臟、腎臟、胃等。

      3. 組織消化。將組織切碎成小塊,加入酶或蛋白酶等消化酶,使細胞質(zhì)解除,細胞分離。

      4. 細胞篩選。將細胞溶液過(guò)篩,去除多余的物質(zhì)如組織碎片等,留下單個(gè)的生物細胞。

      5. 培養基配制。根據細胞類(lèi)型和需求配制不同的培養基,增加適當的營(yíng)養成分、生長(cháng)因子、抗生素等。

      6. 細胞培養。將分離出的細胞加入培養基中進(jìn)行培養??梢允褂门囵B皿、培養瓶和生物反應器等設備。

      7. 細胞觀(guān)察和維護。在培養過(guò)程中觀(guān)察細胞的生長(cháng)、形態(tài)和功能。定期更換培養液、抗生素,定期排除細胞污染。

      8. 細胞傳代。當細胞至達定量時(shí),需要進(jìn)行傳代,即分離細胞,并重新進(jìn)行培養。傳代的次數通常在3-10次。

      如此反復培養、傳代,可形成成系列化的原代細胞體系。成系列化的原代細胞可以應用于各種生物醫學(xué)和生物技術(shù)研究,如疾病的研究、細胞治療、藥物篩選等。
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