小鼠肺癌細胞綠色熒光標記

小鼠肺癌細胞綠色熒光標記描述

Lewis肺癌是一種從C57BL小鼠的肺中建立的細胞系，該細胞帶有原發(fā)性L(fǎng)ewis肺癌的植入所致的腫瘤，被廣泛用作轉移的模型，可用于研究癌癥化學(xué)治療劑的機制。

該細胞通過(guò)慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。

細胞特性

1） 來(lái)源：小鼠肺癌組織

2）形態(tài)：半貼壁生長(cháng)，混合形態(tài)，有上皮細胞樣，松散貼壁或懸浮有梭形、圓形等細胞形態(tài) 。

3）含量：>1x106  細胞數

4）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

小鼠肺癌細胞綠色熒光標記篩選

該細胞為已經(jīng)穩定轉染GFP的細胞，隨細胞傳代次數的增加，其GFP熒光強度會(huì )逐漸減弱。若實(shí)驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。建議收到細胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選。

初次進(jìn)行細胞篩選時(shí)，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的CM培養基維持培養，若無(wú)細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的CM培養基繼續篩選，以此類(lèi)推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過(guò)程中，漂浮細胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養基培養，至細胞密度約80%，可繼續加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時(shí)細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥CM培養基正常培養。